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先讓我們一起來看看熒光顯微成像技術的發(fā)展,所謂熒光,指的是當分子受到光激發(fā)時,電子從基態(tài)躍遷到不穩(wěn)定狀態(tài)的激發(fā)態(tài),電子從**激發(fā)單重態(tài)的低振動能級回到基態(tài)并發(fā)出輻射的光,一般而言,熒光光譜主要包括兩種,一種是激發(fā)譜,而另外一種則是發(fā)射譜,其中激發(fā)譜是熒光物質(zhì)在不同波長的激發(fā)光作用下測得的某一波長處的熒光強度的變化情況,即不同波長的激發(fā)光的相對效率,而發(fā)射譜是某一固定波長的激發(fā)光作用下熒光強度在不同波長處的分布情況,即熒光中不同波長的光成分的相對強度。
激發(fā)態(tài)的高振動能級或第二激發(fā)態(tài),這個時候電子會經(jīng)歷內(nèi)轉換或馳豫振蕩過程到達**激發(fā)態(tài)的低振動能級。由于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài),電子從**激發(fā)單重態(tài)的低振動能級回到基態(tài)并發(fā)出輻射。
熒光顯微鏡是由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部件組成,是利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像。
以熒光顯微鏡為例,熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種,主要區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同,由此決定了熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡結構和使用方法上的不同。
①熒光顯微鏡照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上;
②熒光顯微鏡光源為紫外光,波長較短,分辨力率高于普通顯微鏡;
③熒光顯微鏡有兩個特殊的濾光片,光源前的濾光片用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的濾光片用于濾除紫外線,用以保護人眼。
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【責任編輯】超級管理員
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