（1）取鏡和放置：光學顯微鏡平時存放在柜或箱中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將光學顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上，鏡座后端距桌邊7厘米為宜，便于操作。

（2）對光：用拇指和中指移動旋轉器（切忌手持物鏡移動），使低倍鏡對準鏡臺的通光孔（當轉動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準鏡筒中心）。調節(jié)為較大光圈并將反光鏡轉向光源，左眼在目鏡上觀察（右眼睜開）,同時調節(jié)反光鏡偏轉角度，直到視野內出現明亮光斑為止。

（3）放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用壓片夾夾住，然后移動玻片，將所要觀察的部位調到視野范圍內。

（4）調節(jié)焦距：以左手按逆時針方向轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩慢地下降至物鏡距標本片約5毫米處，應注意在下降鏡筒時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側看著鏡筒下降，以免下降過多，造成鏡頭或標本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩慢下降，直到視野中出現清晰的物像為止。

如果物像不在視野中心，可移動玻片，將所要觀察的部位調到視野范圍內。（注意移動玻片的方向與視野物像移動的方向是相反的）。如果視野內的亮度不合適，可通過調整光圈的大小來調節(jié)，如果在調節(jié)焦距時，鏡臺下降已超過工作距離而未見到物像，說明此次操作失敗，則應重新操作，切不可盲目地上升鏡臺。