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熒光顯微鏡是一種對物質(zhì)進行定性和定量研究的工具,通過將紫外線照射在被檢測物體,使物體發(fā)出熒光從而實現(xiàn)對物質(zhì)細胞內(nèi)的吸收、運輸、化學物質(zhì)的分布及定位的研究。
熒光顯微鏡的使用方法如下:
①開啟熒光顯微鏡:白天用窗簾遮蔽光線,如果是夜間關閉房內(nèi)光源,除去熒光顯微鏡防塵罩,裝上汞燈,插上熒光顯微鏡電源,打開燈源,預熱15分鐘使光源達到很亮。
②調(diào)節(jié)標本位置:將載玻片放置在載物臺并壓緊載玻片,上升載物臺,調(diào)節(jié)載物臺調(diào)整按鈕,使標本在視野中央。
③選擇物鏡矯正畫面清晰度:按照先低倍再高倍的原則選擇,調(diào)節(jié)熒光顯微鏡右下方的旋鈕調(diào)整光源亮度,調(diào)節(jié)“粗調(diào)”與“微調(diào)”矯正畫面的清晰度。
④選擇熒光片調(diào)節(jié)曝光時間:選擇合適的濾光片,打開熒光光閘,調(diào)節(jié)曝光時間,對樣品進行觀察。
⑤拍照:將濾光片撤回,打開IPP系統(tǒng)拍照,選擇照片保存路徑并重命名,注意如果不調(diào)整路徑和重命名,會覆蓋之前的照片,關閉IPP系統(tǒng)與電腦。
⑥關閉汞燈:汞燈工作時間要在半小時到兩個小時之間,汞燈關閉半小時后方可啟動。
⑦收好熒光顯微鏡:向下輕壓載物臺將其鎖在低處,取下載玻片,使用空物鏡朝下,關閉電源,將熒光顯微鏡用防塵罩蓋好。
使用熒光顯微鏡要注意哪些?
①嚴格按照說明書使用,不要對熒光顯微鏡隨意操作。使用熒光顯微鏡前后要登記儀器狀況。
②初次使用熒光顯微鏡要在熟悉操作流程的人員指導下使用。
③使用熒光顯微鏡應該在暗室環(huán)境,觀察標本時要確認眼睛完全適應暗室再進行觀察。
④觀察樣本時要戴上護目鏡,防止紫外線刺傷眼睛。
⑤使用油鏡時要注意操作規(guī)范,避免油滴到載物臺或者其他鏡頭上,后要用二甲苯擦拭鏡頭。
⑥熒光顯微鏡的光源使用壽命有限,觀察標本時要集中觀察,避免頻繁啟動熒光顯微鏡影響使用壽命。
⑦室內(nèi)溫度高時,要對熒光顯微鏡加電扇降溫。
⑧新更換的燈泡要記錄使用時間,避免對燈泡頻繁的啟動。
⑨標本染色后要立即觀察,時間久了熒光會減弱,如果需要放置后檢查,要用聚乙烯塑料袋保存染色樣本。
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【責任編輯】超級管理員
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