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支原體污染對(duì)細(xì)胞有很大的危害。然而,在支原體污染的早期階段,大多數(shù)細(xì)胞的癥狀并不明顯,實(shí)驗(yàn)者也不容易發(fā)現(xiàn)。在污染的中后期,細(xì)胞有以下表現(xiàn):
由于支原體污染早期不易發(fā)現(xiàn),建議實(shí)驗(yàn)室定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)(德國(guó)可以使用)MB公司的Verno ?Gem OneStep試劑盒或Verno ?Gem qOneStep試劑盒,取2ul細(xì)胞上清可判斷是否有支原體污染,靈敏度高,支原體物種覆蓋面廣)。
那么,如何區(qū)分支原體污染和細(xì)菌、真菌和病毒污染呢?
各自的表現(xiàn)如下:
細(xì)菌污染
細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下呈黑色細(xì)沙狀。根據(jù)不同的感染細(xì)菌,它們可以有不同的形狀。培養(yǎng)液一般渾濁發(fā)黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。大多數(shù)細(xì)胞在24小時(shí)內(nèi)死亡。
霉菌污染
培養(yǎng)液清澈,倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì),培養(yǎng)37度孵化器2-3天空依然清澈,但有絮狀雜質(zhì)。鏡子下可以看到細(xì)絲狀的團(tuán)體漂浮物。你可以看到明顯的細(xì)菌,細(xì)胞仍然可以生長(zhǎng),但隨著時(shí)間的推移,細(xì)胞的活力變差。
病毒污染
病毒污染不易發(fā)現(xiàn)。細(xì)胞和培養(yǎng)液沒(méi)有明顯變化。病毒在倒置顯微鏡下是看不見(jiàn)的。大多數(shù)病毒對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響不大,一些外源性病毒會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞變異和轉(zhuǎn)化。病毒污染會(huì)干擾目的病毒的感染和產(chǎn)量。
支原體污染
倒置顯微鏡下看不到支原體。早期污染,培養(yǎng)液不渾濁。后期污染會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基變色、細(xì)胞生長(zhǎng)受抑、細(xì)胞成團(tuán)、鏡下小顆粒甚至死亡。
不知以上介紹你是否清楚,能做好這些污染的保護(hù),相信你培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)越來(lái)越好!
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