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光學顯微鏡可以觀察到細胞膜嗎?
來源: | 發(fā)布日期:2022-05-23 20:19:35
 

是的。寬場光學顯微鏡的分辨率很限為0.24um,能達到細胞分辨器(含細胞膜)的水平。

可通過以下三種光學方法觀察到(相關光學配件需在光學顯微鏡上購買):

1、 相差法:

如下圖所示,單細胞的形態(tài),其中圍繞邊緣薄薄一圈的是細胞膜結構。

通過巧妙地將光的相位差轉(zhuǎn)化為振幅差,使細胞厚度不同的部位產(chǎn)生明暗對比,使我們不需要染色活細胞的形態(tài)結構。

徠卡光學顯微鏡圖片DMi8采用相差法拍攝。

2、 微分干涉法(DIC):

如下圖所示,同一個單細胞的形,其中細胞膜結構是圍繞細胞邊緣微微凸起的薄圈。

微分干涉觀察法識別和過濾同一方向的偏振光,使不同厚度的細胞呈現(xiàn)凹凸的輕微光3D三維效果。我們可以在透明的活細胞上看到細胞的形狀,沒有染色。

徠卡光學顯微鏡圖片DMi8采用微分干涉法拍攝。

3、 熒光法:

如果初學者通過形態(tài)來區(qū)分細胞膜,更確定的區(qū)分方法是特定標記的熒光法。

熒光是一種特殊的標記染色方法,可標記的底物包括蛋白質(zhì),DNA,脂類,離子(如Ca2 )等等。不同的熒光染料對應于不同的標記基底和熒光波長(顏色)?;罴毎部梢詷擞?。目前市場上有多種探針染料或免疫熒光抗體染料,如細胞膜、細胞核、線粒體、溶酶體等。通過在熒光顯微鏡下觀察相應染料的發(fā)光顏色,可以了解相應基底的定性、定位甚至定量關系。

如下圖所示,同一個單細胞成像,綠色部分(邊緣一圈)用鬼筆環(huán)肽標記Actin肌動蛋白屬于細胞骨架。

徠卡光學顯微鏡圖片DMi8采用熒光法三通道拍攝。

如下圖所示,細胞成像、紅色染料(邊緣一圈)標有細胞膜,藍色染料標有細胞核,綠色染料標有細胞漿中的某些蛋白質(zhì)。

徠卡光學顯微鏡圖片DM6B采用熒光法三通道拍攝。

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