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1、不同的成像原理
光學(xué)顯微鏡的基本原理是利用不同樣品的不同結(jié)構(gòu)吸收光的不同特性,以不良亮度的形式呈現(xiàn)樣品的圖像。在電子顯微鏡中,通過檢測器接收、放大和轉(zhuǎn)換為調(diào)制信號,更后在熒光屏上顯示反映樣品表面各種特征的圖像。
2、照明源不同
光學(xué)顯微鏡的照明源是可見光(陽光或照明),電子顯微鏡使用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流。由于電子顯微鏡的放大和分辨率明顯高于光鏡。
HITACHI日立透射鏡HT7800
3、透鏡不同
電子顯微鏡中起放大作用的物鏡是電磁鏡以在中心產(chǎn)生磁場的環(huán)形電磁線圈),而光學(xué)顯微鏡的物鏡是由玻璃制成的光學(xué)透鏡。電子顯微鏡中有三組電磁透鏡,與光學(xué)顯微鏡中的聚光鏡、物鏡和目鏡相當(dāng)
4、景深
一般光學(xué)顯微鏡的景深在于2-3um因此,樣品的表面光滑度要求很高,因此樣品制作過程相對復(fù)雜。掃描電鏡的景深可高達(dá)幾毫米,因此對樣品表面的光滑度幾何沒有要求。樣品制備相對簡單,有些樣品幾何不需要樣品。雖然體式顯微鏡也有較大的景深,但其分辨率很低。
光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡的區(qū)別
5、標(biāo)本制備方法不同
電子顯微鏡觀察中使用的組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序復(fù)雜,技術(shù)難度高,成本高。在材料采集、固定、脫水、包埋等環(huán)節(jié)需要特殊的試劑和操作,包埋的組織塊需要切割成超薄切片機(jī)50~100nm厚超薄標(biāo)本片。光鏡觀察的標(biāo)本一般放置在載玻片上,如普通組織切片標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴片標(biāo)本。
光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)圖
6、分辨率
由于光的干擾和衍射,光學(xué)顯微鏡的分辨率**于2-5um之間。電子顯微鏡的分辨率可以達(dá)到,因?yàn)樗褂秒娮邮鳛楣庠?-3nm因此,光學(xué)顯微鏡的組織觀察屬于微米級分析,電子顯微鏡的組織觀察屬于納米級分析。
7、應(yīng)用領(lǐng)域
光學(xué)顯微鏡主要用于光滑表面的微米組織的觀察和測量。由于可見光作為光源,它不僅可以觀察樣品的表面組織,還可以觀察表面以下的組織。此外,光學(xué)顯微鏡對顏色識別非常敏感和準(zhǔn)確。電子顯微鏡主要用于納米樣品的表面外觀觀測,因?yàn)閽呙桦婄R依靠物理信號的強(qiáng)度來區(qū)分組織信息,因此掃描電鏡的圖像是黑白的,因此無法識別彩色圖像。
HITACHI中大型掃描電鏡SU3800/3900
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